Desenvolupen anàlisi LAMP per diagnosticar els nivells alts d’ADN del VHB

Desenvolupen anàlisi LAMP per diagnosticar els nivells alts d’ADN del VHB

A tot el món, 257 milions de persones estan infectades crònicament amb el virus de l’hepatitis B (VHB) i 887.000 moren anualment de cirrosi o càncer de fetge.

Donat que més del 95% de les persones infectades amb el VHB viuen en països d’ingressos baixos i mitjans i només el 12-25% de les persones infectades són elegibles per a la teràpia anti-VHB.

L’assaig d’amplificació isotèrmica mediada per bucle (LAMP) és una prova d’àcid nucleic (NAT) que utilitza ADN polimerasa amb una alta activitat de desplaçament de fil de cicle automàtic i sis encebadors especialment dissenyats. LAMP té les següents característiques que permeten el seu ús com una prova ràpida, fiable i econòmica en el punt d’atenció als països amb ingressos baixos i mitjans amb una alta eficiència d’amplificació que permet la detecció ràpida d’àcids nucleics.

Un gran equip de científics mèdics associats amb l’Institut Pasteur (Paris, França) va dissenyar conjunts d’encebadors pangenotípics a regions conservades del gen del VHB. L’exactitud de LAMP per identificar pacients altament virèmics es va avaluar en 400 i 550 persones infectades pel VHB a França i Senegal, respectivament. La validació analítica es va realitzar emprant una LAMp turbidimètrica en temps real (Loopamp LA-500, Eiken Chemical, Japó). Les càrregues virals es van quantificar mitjançant una PCR en temps real AMPLIX (Biosynex, Illkirch-Graffenstaden France).

L’equip va informar que els seus encebadors van detectar amb èxit vuit genotips / subgenotips principals del VHB (A1/2/3/B/C/D/E/F) amb un límit de detecció que oscil·lava entre 40 i 400 UI/mL. A França, l’àrea sota la corba de característiques operatives del receptor (AUROC), la sensibilitat i l’especificitat de l’extracció basada en perles i la LAMP turbidimètrica en temps real van ser 0,95, 91,1% i 86,0%, respectivament, per diagnosticar el ADN del VHB ≥ 20.000 UI/mL; i 0,98, 98,0% i 94,6% per ≥200.000 UI/mL.

El rendiment no va variar segons els genotips vitals. Al Senegal, mitjançant un mètode adaptat al camp, extracció per bullit i centrifugat, sense reactius i detecció de fluorescència de punt final econòmica, l’AUROC, la sensibilitat i l’especificitat van ser 0,95, 98,7% i 91,5%, respectivament, per diagnosticar el ADN del VHB ≥200.000 UI/mL. L’assaig no es va adaptar per discriminar la virèmia de baix nivell.

Els autors van concloure que havien desenvolupat una alternativa simple, ràpida (60 minuts) i econòmica (8 dòlars / anàlisi) a la PCR per diagnosticar una virèmia alta ≥200.000 UI/mL. La prova VHB-LAMP pot contribuir a eliminar la transmissió materna-infantil del VHB mitjançant la identificació de dones embarassades d’alt risc elegibles per a la profilaxi antiviral en països amb recursos limitats. L’estudi va ser publicat el 7 d’abril del 2021 a la revista Clinical Microbiology and Infection.

 

Font: labmedica.com

Notícia traduïda per l’ASSCAT

SEGUEIX-NOS A LES NOSTRES RRSS

PRÒXIMS ESDEVENIMENTS

No event found!

ET PODRIA INTERESSAR

La diabetis augmenta el risc de dany hepàtic en persones amb VIH

La diabetis augmenta el risc de dany hepàtic en persones amb VIH

Gairebé la meitat de les persones amb VIH amb elevacions inexplicables dels enzims hepàtics o altres marcadors hepàtics anormals tenien esteatohepatitis no alcohòlica (NASH) i 39 de 116 tenien fibrosi en estadi F3 o F4, i el dany hepàtic avançat es va associar fortament amb la diabetis tipus 2, segons un estudi de quatre països publicat a Clinical Infectious Diseases.

La malaltia del fetge gras té lloc quan el greix s’acumula al fetge. Una major acumulació de greix pot provocar EHGNA, en la qual les cèl·lules del fetge s’inflen i s’inflamen. Si no es controla, l’EHGNA condueix a la cicatrització del teixit hepàtic (fibrosi) i, finalment, a la cirrosi, en la qual les funcions hepàtiques normals disminueixen.

Encara que s’ha informat una alta prevalença de malaltia del fetge gras no alcohòlic (NAFLD) en persones que viuen amb el VIH, no està clar quina proporció d’aquests casos ja tenen NASH o fibrosi avançada. L’única forma de diagnosticar definitivament aquestes afeccions és mitjançant biòpsies de fetge (mostreig directe de teixit hepàtic).

Per obtenir més informació sobre la freqüència de l’EHGNA en persones que viuen amb el VIH, els investigadors dels hospitals del Regne Unit, Itàlia, Canadà i els Estats Units van dur a terme un estudi retrospectiu de mostres de biòpsies de 166 persones amb VIH que havien estat remeses per a la investigació de casos inexplicables. Augments d’enzims hepàtics o altres anomalies en els marcadors de laboratori de malaltia hepàtica entre el 2001 i el 2019.

L’anàlisi va excloure a les persones amb hepatitis B o C, qualsevol càncer actiu, consum d’alcohol superior a 21 unitats per setmana per a homes o 14 unitats per a dones, o qualsevol altra causa de malaltia hepàtica crònica.

Els participants de l’estudi tenien una edat mitjana de 48 anys, el 93% eren homes, el 72% eren blancs i la durada mitjana del tractament antiretroviral va ser de nou anys. La mitjana del recompte de cèl·lules CD4 va ser de 638 cèl·lules / mm3. Cap havia pres anàlegs de nucleòsids més antics associats amb l’esteatosi (estavudina, didanosina). La mitjana de l’índex de massa corporal va ser de 29 kg / m2 (obesitat límit), el 53% tenia pressió arterial alta i el 25% tenia diabetis.

Les biòpsies van mostrar que 63 de 116 persones tenien NAFLD (54%) i 57 (49% de tota la cohort) tenien NASH. 36 persones (31%) tenien fibrosi en estadi F3 i tres (2%) tenien fibrosi F4 (cirrosi).

L’anàlisi multivariada va mostrar que després de controlar els factors metabòlics associats amb NAFLD (model 1) o els factors relacionats amb el VIH (model 2), l’únic factor associat amb NAFLD va ser un índex de massa corporal més alto (raó de possibilitats ajustada 1,20 en ambdós models, p = 0,001) .

La fibrosi avançada (F3 o superior) va ser l’únic factor associat amb la diabetis tipus 2 en l’anàlisi multivariada (ORa 3,42; IC del 95%: 1,00-11,71) i aquesta associació va estar al límit de la significació estadística (p = 0,05).

Utilitzant els resultats de la biòpsia com a estàndard d’or, els investigadors també van avaluar si els marcadors de laboratori podien identificar amb precisió als pacients amb fibrosi avançada. Van descobrir que les puntuacions de fibrosi FIB-4 i NAFLD van tenir un exercici deficient en la identificació de fibrosi avançada, però van mostrar una bona sensibilitat (93%) per descartar casos en els quals l’àrea proporcional de col·lagen (CPA) estava per sobre del 7,6%. El CPA mesura el percentatge de teixit hepàtic fibròtic i s’ha demostrat que un nivell superior al 7,6% prediu els resultats adversos a llarg termini de la malaltia hepàtica.

El baix valor pronòstic dels marcadors no invasius de la fibrosi hepàtica en persones que viuen amb el VIH porta als investigadors a recomanar la consideració de la biòpsia hepàtica com una eina de detecció en persones amb VIH que són obeses, especialment aquelles amb diabetis tipus 2.

No obstant, també senyalen que el 41% de les persones derivades per a una biòpsia no tenien NAFLD. Les seves elevacions dels enzims hepàtics van romandre sense explicació, però 15 d’aquests 53 pacients tenien fibrosi avançada (puntuació d’Ishak de 3 o més). L’únic factor associat amb la fibrosi avançada en aquells sense NAFLD va ser el temps des del diagnòstic del VIH (21 anys front a 11,5 anys, p = 0,005), tot i que l’edat va ser similar entre els dos grups.

 

Font: infohep.org

Referència: Maurice J et al. Increased BMI and type 2 diabetes are the main predictors of NAFLD and advanced fibrosis in liver biopsies of patients with HIV mono-infection. Clinical Infectious Diseases, advance online publication, 2 September 2020. https://doi.org/10.1093/cid/ciaa1302

Notícia traduïda per l’ASSCAT

SEGUEIX-NOS A LES NOSTRES RRSS

PRÒXIMS ESDEVENIMENTS

No event found!

ET PODRIA INTERESSAR

La infecció pel virus de l’hepatitis D en la població mundial és molt més freqüent del que es creia: resultats d’una revisió sistemàtica i metanàlisi

La infecció pel virus de l’hepatitis D en la població mundial és molt més freqüent del que es creia: resultats d’una revisió sistemàtica i metanàlisi

El 2010, es va estimar que al voltant de 248 milions de persones eren portadores de l’HBsAg (diagnòstic d’hepatitis per virus B) a nivell mundial.

A partir del 2016, es va estimar que 468 milions de persones vivien amb l’hepatitis B i que 119 milions de persones s’havien infectat durant aquest mateix any. Els estudis científics han demostrat que la infecció pel virus de l’hepatitis B (VHB), que va ser descoberta el 1963 per Blumberg, és la causa més comuna de carcinoma hepatocel·lular (CHC) a tot el món. El percentatge de pacients amb cirrosi hepàtica i càncer de fetge degut al VHB ha augmentat entre el 2006 i el 2016.

El virus de l’hepatitis D (VHD) va ser descobert per primer cop per Rizzeto i col·legues a mitjans de la dècada del 1970 mentre investigaven a un grup de pacients amb VHB amb hepatitis greu. El VHD és un virus defectuós ja que només pot propagar-se si existeix el VHB. S’estimava que aproximadament el 5% dels portadors crònics de VHB es coinfectan amb VHD. Segons les dades publicades entre els anys 80 i 90, s’estimava que entre 15 i 20 milions de persones eren portadores del VHD a tot el món.

Els estudis sistemàtics realitzats sobre la història natural de la coinfecció crònica del VHB i VHD és una de les formes més greu d’hepatitis viral, i aquest grup té un risc més elevat de desenvolupar cirrosi i HCC que les persones amb monoinfecció per VHB. El 2015, 97 nacions havien inclòs la vacuna del VHB pels recent nascuts, i 180 països van incloure la vacuna HepB3 (HepB3 = tres dosis de la vacuna de l’hepatitis B) en el seu programa de vacunacions de rutina.

No obstant, encara es detecten brots epidèmics d’infecció per VHD i les opcions de tractament de la infecció per VHD segueixen sent molt limitades, donar que l’únic tractament parcialment eficaç és l’interferó. Després de l’administració d’interferó (IFN) α o d’IFN-pegilado podrien produir-se recaigudes. No hi ha cap estudi publicat a la literatura que hagi avaluat globalment el nombre de persones afectades per la infecció per VHD. Per tant, es precisen estimacions fiables per establir la prevalença actualitzada de la infecció pel VHD. L’objectiu del present estudi és investigar la prevalença actual, els genotips i els factors de risc associats a la infecció per VHD.

Objectiu

El virus de l’hepatitis D (VHD) és un virus defectuós que precisa en el seu cicle de vida el virus de l’hepatitis B (VHB). Es pot produir una coinfecció quan es transmeten a la vegada o bé la persona portadora del VHB pot patir una superinfecció. El VHB amb superinfecció pel VHD s’ha considerat com una de les formes més greus d’hepatitis viral crònica. Tanmateix, existeixen poques dades sobre la càrrega global de la infecció pel VHD.

Disseny

Es van realitzar cerques sobre hepatitis delta a PubMed, Embase, la biblioteca de Cochrane i bases de dades integrades de recursos de coneixement de la Xina des de l’1 de gener del 1977 fins el 31 de desembre del 2016. Es van incloure estudis amb una mida de mostra mínim de 50 pacients. El present estudi va analitzar dades referides a un total de 40 milions d’individus per estimar la prevalença de VHD emprant el model d’efectes aleatoris Der-Simonian. Les dades es van categoritzar d’acord amb els factors de risc.

Resultats

D’un total de 2.717 estudis inicialment identificats, només 182 articles de 61 països i regions van complir amb els criteris d’inclusió final. La prevalença general del VHD va ser del 0,98% de la població (95% IC 0,61 a 1,42). En la població amb HBsAg positiu, la prevalença combinada de VHD va ser del 14,57% (95% IC 12,93 a 16,27): la seroprevalença va ser del 10,58% (95% IC 9,14 a 12,11) en la població general sense factors de risc, si existia d’ús de drogues per via intravenosa (UDVI) i/o comportament sexual de risc de CSR va ser del 37,57% (95% IC 29,30 a 46,20), en la població UDVI i del 17,01% (95% IC 10.69 a 24.34) en la població amb CSR.

Conclusió

S’estima que aproximadament el 10,58% de portadors d’HBsAg (no UDVI ni CSR) es troben coinfectats amb el VHD, que és el doble del que s’ha estimat anteriorment. També s’observa una prevalença de VHD substancialment major en la població d’UDVI i en els individus amb CSR. Després del present estudi es destaca la necessitat d’un major interès en la detecció del VHD de rutina i la implementació rigorosa del programa de vacunes contra el VHB.

Importància d’aquest estudi

Què es sap ja sobre aquest tema?

  • És coneguda l’elevada prevalença del virus de l’hepatitis D (VHD) avaluada entre les poblacions positives pel HBsAg en les regions africanes.
  • Però es necessiten més estudis per determinar la càrrega del VHD i els factos de risc per a la infecció de VHD a tot el món.
  • Aquests resultats són importants per impulsar l’examen de rutina per detectar el VHD i impulsar el programa de vacunació antivirus de l’hepatitis B (VHB).

Quins són els nous descobriments?

  • La prevalença del VHD entre dos grups especials (usuaris de drogues intravenoses i persones que tenen un comportament sexual d’alt risc) va ser molt major que en la població general.
  • La prevalença combinada del VHD en la població amb HBsAg-positiu va ser el doble del que es va estimar anteriorment.
  • L’aparició de nous genotips VHD a Europa és un repte i és de destacar pel futur.

Com podria impactar en la pràctica clínica del futur?

  • La tendència temporal que segueix la infecció pel VHD no és tan optimista com ens imaginàvem, suggerint que és precís que es posin en pràctica amb la major urgència les directrius internacionals de cribratge del VHD i del programa de vacunació anti-VHB.

Comentaris de l’ASSCAT

Després de llegir aquesta revisió sistemàtica publica a la revista Gut sobre l’hepatitis per VHD sabem que és una infecció molt més freqüent del que ens imaginàvem. S’estima que més de 60 milions de persones a tot el món podrien estar infectades pel VHD. Aquesta xifra és molt més elevada del que s’havia estimat abans, afecta en especial a usuaris de drogues intravenoses i a persones amb pràctiques sexuals de risc i a més aquesta infecció ha anat en augment en els últims anys.

Què podem aprendre d’aquest estudi? El nombre de persones que s’estima infectades pel VHD és molt major del que es pensava anteriorment, tot i que la veritable prevalença del VHD segueix sent un tema de debat. Basant-nos en els nombres presentats a l’article de Chen et al., es poden calcular xifres que poden ser conflictives i sense precedents.

En conclusió, la càrrega de la malaltia global causada pel VHD, està augmentant i és urgent diagnosticar als afectats, per poder-los tractar quan això sigui possible, detectar als seus contactes per vacunar-los i implementar les directrius de vacunació eficaç amb tres dosis de la vacuna anti-VHB.

 

Font: Gut

Referència: Chen H-Y, et al. Gut 2019;68:512–521.

Article traduït i adaptat per l’ASSCAT

SEGUEIX-NOS A LES NOSTRES RRSS

PRÒXIMS ESDEVENIMENTS

No event found!

ET PODRIA INTERESSAR

Com afecta la curació de l’hepatitis C al risc de càncer de fetge a llarg termini?

Com afecta la curació de l’hepatitis C al risc de càncer de fetge a llarg termini?

Els científics no estan segurs, però saben que el risc que torni un cas anterior de càncer de fetge segueix sent alt pels curats d’hepatitis C.

Una de les raons principals per curar el virus de l’hepatitis C (VHC) és reduir el risc de progressió de la malaltia hepàtica. Dit això, pot sorprendre a moltes persones que viuen amb el virus que els científics encara no necessàriament tenen una idea precisa de com el VHC afecta al risc de certs resultats de salut importants, en particular el carcinoma hepatocel·lular (CHC).

El 2017, un equip d’investigadors va publicar una revisió Cochrane de 157 assajos en els quals van concloure que “no podien determinar de manera fiable” l’efecte del tractament antiviral d’acció directa (AAD) pel VHC en el risc de diverses malalties i mort. El document es va trobar amb un temporal de controvèrsies i crítiques, ja que altres científics en el camp van criticar als seus autors per confiar en estudis amb períodes de seguiment relativament curts.

De fet, va haver-hi proves, van afirmar aquests crítics amb fermesa, que van indicar que aconseguir una resposta virològica sostinguda de 12 setmanes després de completar la teràpia amb AADs (RVS12, considerada una curació) proporciona el tipus de beneficis que els investigadors Cochrane van dir que no podien detectar.

Sobre el tema del risc de càncer de fetge, els investigadors van publicar un article el 2017 que semblava desmentir teories anteriors que curar el VHC amb tractament amb interferó s’associava amb un menor risc de desenvolupar CHC que amb el tractament amb AADs.

Però fins i tot si no existeix una diferència en el risc de CHC segons el tipus de tractament contra el VHC, a quin risc de càncer de fetge s’enfronten els curats del virus a llarg termini? Segons una revisió sistemàtica de 42 estudis recentment publicats a Frontline Gastroenterology, el risc d’un primer diagnòstic de càncer de fetge segueix sent relativament baix per aquesta població. No obstant, entre els que tenien CHC abans de començar el tractament curatiu de l’hepatitis C, la possibilitat d’una recurrència de la malaltia segueix sent molt alta.

Cercant descobriments que fossin el més sòlids possible, els autors de l’estudi van limitar la seva revisió dels articles que van informar sobre els primers diagnòstics de CHC posteriors a l’hepatitis C a aquells que incloïen cohorts de més de 100 persones. No tenien aquesta restricció pels estudis que analitzen els diagnòstics de càncer de fetge recurrent.

L’edat mitjana dels participants en aquests estudis va variar de 50 a 72 anys. Van ser seguits durant una mitjana de tres a 70 mesos.

L’autor principal de la revisió sistemàtica, Sonal Singh, MD, internista en el Departament de Medicina Familiar i Salut Comunitària de la Facultat de Medicina de la Universitat de Massachusetts a Worcester, diu que el seu treball no es va proposar determinar com la cura de l’hepatitis C va afectar al risc d’un primer diagnòstic de càncer de fetge. No obstant, una metanàlisi que ell i el seu equip van realitzar de tres estudis van mostrar que aconseguir una RVS va reduir el risc de càncer de fetge recurrent en un 50%; no obstant, aquest descobriment no va ser estadísticament significatiu, el que vol dir que podria haver tingut lloc per casualitat.

Singh diu que els investigadors de l’hepatitis C no han produït el tipus de dades de seguiment prolongades necessàries per realitzar una avaluació adequada de la relació entre la RVS i el risc de CHC.

Després d’observar vuit estudis que tenien un grup de control i 36 que no en tenien, Singh i els seus coautors van trobar que, dels participants de l’estudi que no havien tingut càncer de fetge abans del tractament de l’hepatitis C, l’1,5% d’aquells que no estaven en els estudis no controlats i el 3,3% d’aquells en estudis controlats es van diagnosticar amb CHC. Quant a aquells que ja havien tingut CHC abans de rebre la teràpia amb hepatitis C, un 16,7% i un 20,1% dels estudis no controlats i controlats van veure el seu càncer recurrent després de la curació del VHC.

En altres paraules, la probabilitat d’un diagnòstic de càncer de fetge dins de diversos anys de curar el VHC va ser d’aproximadament 1 en 67 per aquells que encara no havien estat diagnosticats amb CHC i d’1 en 6 per aquells que ho havien fet.

En comparació, la taxa de diagnòstic de càncer de fetge entre les persones amb hepatitis C crònica és d’aproximadament 1 a 3% per any i és més alta entre les persones amb cirrosi.

“No estic tractant d’espantar als pacients”, diu Singh. Parlant dels AAD, explica: “Crec que són tractaments molt efectius i estic tractant als meus pacients; tothom els està tractant. Però també estic seguint als meus pacients molt d’a prop després que s’hagin curat de l’hepatitis C”.

Singh i els seus coautors no van expressar els seus descobriments en una taxa de diagnòstic anual més generalitzable perquè no tenien dades suficients per determinar de forma fiable quant de temps havien investigat els investigadors en els diversos estudis els membres de l’estudi.

Els autors també van senyalar que la qualitat general de l’evidència que donava suport els seus descobriments era baixa. Per tant, sense els estudis de cohorts controlats d’alta qualitat de persones curades del VHC i sense un seguiment més prolongat d’aquests individus, els autors de la revisió “no poden confirmar ni descartar un augment o una disminució del risc de CHC incidental o recurrent després de la teràpia oral amb AADs”.

Segons Singh, és possible que durant un cert període després de l’hepatitis C, el fet de curar el virus, en comparació amb no fer-ho, en realitat augmenti temporalment el risc de càncer de fetge; i després, el risc disminueix per sota dels nivells de curació previs al VHC, pel que el risc de per vida és menor gràcies a la lluita contra l’hepatitis C.

Les teories sobre perquè la curació de l’hepatitis C poden conduir a un augment temporal en la probabilitat de càncer de fetge, s’enfoquen en la possibilitat que degut a que el virus pot atacar a les cèl·lules precanceroses, la sobtada manca de VHC gràcies a una cura pot permetre que aquestes cèl·lules aflorin. A més, alterar ràpidament l’equilibri entre la inflamació del fetge i les forces antiinflamatòries amb el tractament de l’hepatitis C podria afecta el desenvolupament de cèl·lules malignes.

Tenint en compte aquestes teories i la incertesa sobre com el tractament del VHC afecta el risc de càncer de fetge, Singh advoca per un major control mèdic continu, possiblement indefinit, de les persones que han aconseguit una RVS. També demana més investigació per proporcionar respostes clares per abordar aquesta incertesa. El seu article posa l’èmfasi en què els estudis haurien d’analitzar com altres variables poden influir en el risc de CHC entre les persones tractades pel VHC, inclosos el genotip viral, el consum d’alcohol, la coinfecció pel virus de l’hepatitis B, els nivells d’alfa-fetoproteïna i l’etapa de cirrosi.

 

Font: hepmag.com

Notícia traduïda per l’ASSCAT

SEGUEIX-NOS A LES NOSTRES RRSS

PRÒXIMS ESDEVENIMENTS

No event found!

ET PODRIA INTERESSAR

"/

ASSCAT,
a partir de mediados de diciembre de 2024, lamentablemente quedará disuelta, por lo que no podrá atender ninguna solicitud que se le presente. Queremos expresar nuestro más sincero agradecimiento a todas las personas, profesionales, colaboradores, entidades, colectivos y ciudadanos que han participado y contribuido a los logros alcanzados a lo largo de nuestra trayectoria. Gracias por vuestro apoyo. Salud, suerte y mucha proactividad.

ASSCAT,
a partir de mitjans de desembre de 2024, lamentablement quedarà dissolta, i no podrà atendre cap sol·licitud que se li presenti. Volem expressar el nostre més sincer agraïment a totes les persones, professionals, col·laboradors, entitats, col·lectius i ciutadans que han participat i contribuït als èxits assolits al llarg de la nostra trajectòria. Gràcies pel vostre suport. Salut, sort i molta proactivitat.

ASSCAT,
as of mid-December 2024, will unfortunately be dissolved and will no longer be able to address any requests. We would like to express our deepest gratitude to all the individuals, professionals, collaborators, organizations, groups, and citizens who have participated and contributed to the achievements throughout our journey. Thank you for your support. Health, luck, and great proactivity.